Plasmide Double Nickase (h) Glucose Transporter Glut8: sc-403183-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Glucose Transporter Glut8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Glucose Transporter Glut8 Double Nickase (h) et le plasmide Glucose Transporter Glut8 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC2A8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Glucose Transporter Glut8 | sc-403183-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Glucose Transporter Glut8 | sc-403183-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC2A8 code le transporteur de glucose Glut8 (GLUT8), un transporteur facilitateur de sucres qui contribue à l’absorption cellulaire des glucides et à la distribution intracellulaire du glucose de manière dépendante du tissu et du contexte. L’activité de GLUT8 soutient l’homéostasie métabolique en influençant le flux glycolytique, la gestion du glycogène et, plus largement, les programmes de transport de nutriments sensibles à l’insuline, avec des effets en aval sur des voies de détection énergétique telles qu’AMPK et mTOR. La régulation de l’expression de SLC2A8 et le trafic du transporteur ont été étudiés en lien avec des phénotypes endocriniens et métaboliques, notamment la résistance à l’insuline et des altérations de la gestion du glucose. Comme le transport du glucose contraint les besoins anaboliques et redox, SLC2A8 est également pertinent pour des travaux mécanistiques sur la prolifération, la différenciation et l’adaptation au stress dans des cellules métaboliquement actives.
Glucose Transporter Glut8 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC2A8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC2A8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC2A8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC2A8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.