Glucose Transporter Glut3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423000

概要

Slc2a3は、高親和性の促進型グルコーストランスポーターであるGLUT3をコードしており、神経細胞や活性化した免疫細胞集団など、代謝需要の高いマウス細胞における基礎的なグルコース取り込みの主要経路の一つである。GLUT3は細胞内のグルコース利用可能量を調節することで、解糖系フラックス、ATP産生、ならびに栄養感知を細胞の生存・増殖に結びつける生合成経路を支える。GLUT3活性の変化は、レドックスバランスやAMPK、mTORといった代謝シグナル伝達ネットワークを変動させ、ストレス応答や分化プログラムに影響を及ぼし得る。グルコース輸送の破綻は、グルコース利用の変化が病態生理に寄与する神経生物学、炎症、代謝駆動性の疾患表現型といった文脈で、しばしば検討されている。

Glucose Transporter Glut3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSlc2a3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Slc2a3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Slc2a3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Glucose Transporter Glut3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Glucose Transporter Glut3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Slc2a3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Glucose Transporter Glut3の機能に不可欠なSlc2a3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Slc2a3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Glucose Transporter Glut3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGlucose Transporter Glut3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Slc2a3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Glucose Transporter Glut3 HDRプラスミド（m）および Glucose Transporter Glut3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSlc2a3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSlc2a3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。