Glucose Transporter Glut10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-431260

概要

Slc2a10 は、マウス組織における細胞の糖質処理およびレドックス恒常性に寄与する促進拡散型ヘキソーストランスポーターであるグルコーストランスポーター GLUT10 をコードします。GLUT10 は、グルコースまたはデヒドロアスコルビン酸の細胞内輸送に関与するとされ、糖のフラックスを、ミトコンドリア機能や細胞外マトリックスの維持に影響する抗酸化経路と結び付けます。これらの役割を通じて、Slc2a10 は代謝適応、酸化ストレス応答、ならびに血管の結合組織生物学の研究において重要です。Slc2a10 の遺伝子破壊は、動脈蛇行症候群（arterial tortuosity syndrome）様の表現型、コラーゲン／エラスチンの組織化の変化、そしてストレス感受性の代謝リモデリングの基盤となる機構を実験モデルで検討するために用いられます。

Glucose Transporter Glut10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSlc2a10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Slc2a10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Slc2a10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Glucose Transporter Glut10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Glucose Transporter Glut10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Slc2a10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Glucose Transporter Glut10の機能に不可欠なSlc2a10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Slc2a10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Glucose Transporter Glut10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGlucose Transporter Glut10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Slc2a10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Glucose Transporter Glut10 HDRプラスミド（m）および Glucose Transporter Glut10 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSlc2a10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSlc2a10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。