GH-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401171

概要

ヒトGH2は成長ホルモン2（GH-2）をコードしており、下垂体由来のペプチドホルモンとして、成長ホルモン受容体シグナル伝達を介して体の成長、栄養素の配分、ならびに代謝恒常性を調節します。下流の経路活性には、IGF軸の制御とのクロストークを伴うJAK2/STATによる転写プログラムが含まれ、細胞増殖、分化、組織リモデリングに影響を与えます。成長ホルモンシグナルの変調は内分泌および代謝の表現型と関連づけられており、疾患に関連した状況における成長制御の破綻を研究する上で重要です。

GH-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGH2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GH2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GH2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GH-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GH-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GH2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GH-2の機能に不可欠なGH2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GH2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GH-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGH-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GH2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GH-2 HDRプラスミド（h）および GH-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGH2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGH2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。