Gelsolin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-432743

개요

마우스 Gsn 유전자는 Ca2+에 의해 조절되는 액틴 결합 단백질인 젤솔린(gelsolin)을 암호화하며, 액틴 필라멘트를 절단(severing)하고, 캡핑(capping)하며, 핵형성(nucleation)함으로써 세포골격 재구성을 조절합니다. 액틴 역학을 미세하게 조정함으로써 젤솔린은 세포 형태 변화, 이동성, 엔도사이토시스, 파고사이토시스에 기여하며, 인지질(포스포이노시타이드) 조절 및 Rho 계열 GTPase 연계 경로처럼 막에서의 신호를 액틴 재조직화로 연결하는 신호 네트워크와도 상호작용합니다. 젤솔린의 활성 및 발현 변화는 비정상적인 세포 이동, 염증 반응, 조직 재형성과 연관되어 있어, 세포골격 구동 표현형을 연구하는 데 유용한 핵심 노드로 여겨집니다. 마우스 시스템에서 Gsn 교란은 혈관생물학, 신경생물학, 면역세포 기능과 관련된 액틴 의존적 과정의 기전을 연구하는 데 도움이 됩니다.

Gelsolin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Gsn 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Gsn 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Gsn의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Gelsolin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Gelsolin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Gsn 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Gelsolin 기능에 중요한 Gsn 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Gsn 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Gelsolin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Gelsolin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Gsn 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Gelsolin HDR 플라스미드 (m) 및 Gelsolin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Gsn 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Gsn 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.