Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
GCM2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430769
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GCM2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GCM2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GCM2 Anticuerpo (C-5): sc-390603
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GCM2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-430769 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Gcm2 codifica el factor de transcripción GCM2, miembro de la familia *glial cells missing*, que se une al ADN para regular programas de expresión génica específicos de linaje. En el desarrollo del ratón, GCM2 es fundamental para la especificación y el mantenimiento de la glándula paratiroides, coordinando redes transcripcionales que sostienen la homeostasis del calcio y el fosfato mediante la regulación de vías asociadas a la hormona paratiroidea. La alteración de Gcm2 perturba la diferenciación y la identidad del tejido endocrino, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar el control transcripcional de la organogénesis. La función alterada de GCM2 se asocia con defectos del desarrollo paratiroideo y fenotipos de desregulación del metabolismo mineral, lo que respalda su relevancia en modelos de mecanismos de enfermedad endocrina y metabólica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GCM2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gcm2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gcm2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gcm2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GCM2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gcm2 para la investigación de la señalización de GCM2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Gcm2 críticos para la función de GCM2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gcm2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GCM2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido GCM2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gcm2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GCM2 (m) y el plásmido HDR GCM2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gcm2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gcm2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.