GCM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420510

Descripción general

Gcm1 codifica el factor de transcripción GCM1, un regulador de unión al ADN esencial para la diferenciación de los trofoblastos placentarios y la formación del laberinto durante el desarrollo del ratón. GCM1 controla programas génicos implicados en la especificación del destino celular, la formación del sincitiotrofoblasto y la morfogénesis por ramificación, coordinando la expresión de vías que gobiernan la fusión celular, el intercambio de nutrientes y la maduración de la interfaz vascular. La actividad desregulada de GCM1 se asocia con una placentación anormal y un crecimiento fetal deficiente, por lo que es relevante para estudios de trastornos del desarrollo y de la fisiopatología placentaria. Además de su función en el desarrollo, las redes transcripcionales dependientes de GCM1 proporcionan un sistema manejable para analizar la regulación génica específica de linaje.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GCM1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gcm1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gcm1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gcm1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GCM1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gcm1 para la investigación de la señalización de GCM1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Gcm1 críticos para la función de GCM1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gcm1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GCM1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido GCM1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gcm1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GCM1 (m) y el plásmido HDR GCM1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gcm1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gcm1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.