GBDR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409781

Visão geral

UBAC1 (também reportado como GBDR1) codifica uma proteína que contém um domínio associado à ubiquitina, implicada no controlo de qualidade de proteínas dependente de ubiquitina e na regulação do turnover proteico. Ao interagir com substratos ubiquitinados e ao estabelecer interface com o sistema ubiquitina–proteassoma, a UBAC1 está posicionada para influenciar vias que governam a proteostase, as respostas ao stress e a dinâmica de sinalização, por meio da degradação controlada de componentes dessas vias. A desregulação de redes de ubiquitinação está amplamente associada a sinalização inflamatória aberrante, alterações no controlo do ciclo celular e processos neurodegenerativos e oncogénicos, tornando a UBAC1/GBDR1 um nó relevante para estudos mecanísticos da regulação mediada por ubiquitina. Investigar a função da UBAC1 pode ajudar a esclarecer como o reconhecimento e o tráfego de ubiquitina contribuem para a robustez das vias em condições basais e de stress.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GBDR1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene UBAC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do UBAC1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do UBAC1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GBDR1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de UBAC1 para a investigação da sinalização de GBDR1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) UBAC1 críticos para a função GBDR1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos UBAC1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GBDR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GBDR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus UBAC1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GBDR1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GBDR1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia UBAC1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo UBAC1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.