Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
GATA-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400724
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GATA-6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GATA-6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GATA-6 Anticorpo (3H3-H6-H11): sc-517554
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GATA-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400724 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GATA6 codifica o GATA-6, um fator de transcrição do tipo dedo de zinco que se liga a motivos GATA para regular a especificação de linhagens e programas de diferenciação em tecidos derivados do endoderma e do mesoderma. Participa de redes transcricionais com fatores como NKX2-5 e membros da família TBX para coordenar a organogênese e decisões de destino celular, e integra sinais de vias como WNT, BMP e TGF-β. Em células adultas, o GATA-6 contribui para a regulação de genes epiteliais e de músculo liso, para o metabolismo celular e para a remodelação transcricional responsiva ao estresse. A atividade desregulada de GATA6 tem sido associada a defeitos do desenvolvimento e é frequentemente estudada no contexto de estados de diferenciação alterados e de dependências transcricionais observadas em múltiplos modelos de doença, incluindo o câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GATA-6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GATA6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GATA6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GATA6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GATA-6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GATA6 para a investigação da sinalização de GATA-6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GATA6 críticos para a função GATA-6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GATA6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GATA-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GATA-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GATA6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GATA-6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GATA-6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GATA6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GATA6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.