gasdermin C CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-429915

概要

マウスのGsdmcは、ガスダーミンファミリーに属するガスダーミンCをコードしており、プロテアーゼ活性化の下流で起こる制御された細胞死や、炎症に伴う膜透過化に関与するとされています。ガスダーミンは形質膜にポア（孔）を形成することで、ピロトーシス様の過程における実行因子として働き得て、その結果、サイトカイン放出、上皮バリアの完全性、自然免疫シグナル伝達に影響を与えます。Gsdmcの発現は上皮系の文脈で高いことが多く、NF-κB駆動性の炎症や組織リモデリングのプログラムと交差するストレス応答との関連も報告されています。したがって、ガスダーミン活性の破綻は、マウスモデルにおける炎症性病態、宿主―微生物相互作用、ならびにがん関連の細胞死表現型を研究するうえで重要です。

gasdermin C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるGsdmc遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Gsdmc内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Gsdmcのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、gasdermin Cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、gasdermin Cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Gsdmc欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• gasdermin Cの機能に不可欠なGsdmcエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Gsdmcゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• gasdermin C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびgasdermin C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Gsdmc遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  gasdermin C HDRプラスミド（m）および gasdermin C HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGsdmcホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGsdmc標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。