galectin-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m2): sc-421417-KO-2

概要

Lgals4は、β-ガラクトシド結合性レクチンであるガレクチン-4をコードしている。ガレクチン-4は腸上皮に豊富に発現するタンデムリピート型ガレクチンで、糖鎖修飾を受けた膜タンパク質や糖脂質と会合し、頂端側（アピカル）マイクロドメインの構築や、細胞―細胞間および細胞―細胞外マトリックス間相互作用の制御に関与する。ガレクチン-4は上皮分化、バリア維持、糖タンパク質の輸送に寄与し、さらに細胞表面での糖鎖依存的な結合を介してシグナル伝達や免疫コミュニケーションを調節しうる。マウス組織では、Lgals4発現の変化が粘膜炎症や上皮恒常性の変動と関連づけられており、腸管生理や炎症に伴うリモデリングの研究において重要である。また、そのレクチン活性は、接着、遊走、上皮ストレス応答に影響する糖鎖依存性経路の解析にも有用である。

galectin-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）は、mouse細胞株におけるLgals4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Lgals4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Lgals4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、galectin-4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、galectin-4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Lgals4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• galectin-4の機能に不可欠なLgals4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Lgals4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• galectin-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびgalectin-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Lgals4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  galectin-4 HDRプラスミド（m）および galectin-4 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLgals4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLgals4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。