galectin-4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-421417-KO-2

Descripción general

Lgals4 codifica la lectina fijadora de β-galactósidos galectina-4, una galectina de repeticiones en tándem enriquecida en el epitelio intestinal que se asocia con proteínas de membrana y glicolípidos glicosilados para organizar microdominios apicales y regular las interacciones célula–célula y célula–matriz. La galectina-4 contribuye a la diferenciación epitelial, al mantenimiento de la barrera y al tráfico de glicoproteínas, y puede modular la señalización y la comunicación inmunitaria mediante unión dependiente de carbohidratos en la superficie celular. En tejidos de ratón, la alteración de la expresión de Lgals4 se ha vinculado con cambios en la inflamación mucosa y la homeostasis epitelial, lo que la hace relevante para estudios de fisiología intestinal y remodelado asociado a la inflamación. Su actividad lectínica también permite investigar vías dependientes de la glicosilación que influyen en la adhesión, la migración y las respuestas del epitelio al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO galectin-4 (m2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Lgals4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Lgals4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Lgals4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína galectin-4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Lgals4 para la investigación de la señalización de galectin-4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Lgals4 críticos para la función de galectin-4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Lgals4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido galectin-4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido galectin-4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Lgals4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR galectin-4 (m) y el plásmido HDR galectin-4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Lgals4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Lgals4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.