Plásmido Doble Nickase (h) GABAA Rπ: sc-404623-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GABAA Rπ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GABAA Rπ (h) y el plásmido de doble nickasa GABAA Rπ (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GABRP. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GABAA Rπ | sc-404623-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GABAA Rπ | sc-404623-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRP codifica la subunidad π del receptor GABA\(_A\) humano, un canal de cloruro activado por ligando que media la neurotransmisión inhibitoria y modula la excitabilidad de la membrana mediante señalización sináptica y extrasináptica rápida. La incorporación de la subunidad π puede alterar el ensamblaje del receptor, la cinética de compuerta y la farmacología, influyendo en el flujo de cloruro, los patrones de disparo neuronal y la inhibición a nivel de circuitos. La señalización del receptor GABA\(_A\) se integra con procesos como la plasticidad sináptica, el neurodesarrollo y la modulación de redes neuronales en respuesta al estrés. La desregulación de la señalización gabaérgica, incluida una composición alterada de subunidades del receptor, se ha asociado en la literatura con fenotipos neurológicos y neuropsiquiátricos, lo que respalda la investigación de GABRP en modelos celulares relevantes para la enfermedad.
GABAA Rπ El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GABRP en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GABRP. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GABRP. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GABRP alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.