GABA_A Rπ CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404623

概要

GABRPは、ヒトGABA\(_A\)受容体のπサブユニットをコードしています。GABA\(_A\)受容体はリガンド作動性の塩化物チャネルで、抑制性神経伝達を担い、膜興奮性を調節します。πサブユニットが組み込まれることで、受容体の組み立て、イオン伝導性、薬理学的特性が変化し、シナプス伝達やその下流の神経回路活動に影響を及ぼします。GABA\(_A\)受容体シグナルは、カルシウム依存性経路、神経発達、興奮—抑制バランスの恒常性維持とも関連しています。GABRPの発現や制御の変化は、神経精神疾患および神経疾患の病態研究に加え、GABA作動性要素が増殖や分化プログラムに影響し得る上皮細胞シグナルの研究においても検討されています。

GABAA Rπ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGABRP遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GABRP内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GABRPのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GABAA Rπタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GABAA Rπシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GABRP欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GABAA Rπの機能に不可欠なGABRPエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GABRPゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GABAA Rπ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGABAA Rπ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GABRP遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GABAA Rπ HDRプラスミド（h）および GABAA Rπ HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGABRPホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGABRP標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。