G3BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-424175

概要

G3bp1は、細胞ストレス下でストレス顆粒の形成を核形成し、mRNAの選別（トリアージ）を調整するRNA結合タンパク質G3BP1をコードします。G3BP1は翻訳開始因子やシグナル伝達因子との相互作用を介して、ストレス応答をmRNA安定性の制御、自然免疫シグナル、アポトーシスを調節する経路へと結び付けており、MAPK経路やインターフェロン関連プログラムとのクロストークも含まれます。マウス系では、G3BP1は抗ウイルス制限や炎症性シグナルの調節における役割に加え、プロテオスタシスや細胞運命決定へのより広範な影響についても一般的に研究されています。G3BP1が関与するストレス顆粒ダイナミクスの破綻は、実験モデルにおいて神経変性やがん関連表現型と関連付けられており、疾患機序研究における重要性が示唆されています。

G3BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるG3bp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、G3bp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、G3bp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、G3BP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、G3BP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、G3bp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• G3BP1の機能に不可欠なG3bp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、G3bp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• G3BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびG3BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、G3bp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  G3BP1 HDRプラスミド（m）および G3BP1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはG3bp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のG3bp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。