FXR/NR1H4 Lentiviral Activation Particles (h): sc-417410-LAC

NR1H4 kodiert den Farnesoid-X-Rezeptor (FXR), einen ligandenaktivierten nukleären Rezeptor, der als transkriptioneller Regulator der Homöostase von Gallensäuren, Cholesterin und Lipiden fungiert. FXR integriert Signale von Gallensäuren, um Gen-Netzwerke zu steuern, die die Gallensäuresynthese und den -transport regulieren, einschließlich der Feedback-Regulation hepatischer Stoffwechselwege und des enterohepatischen Kreislaufs. Durch Crosstalk mit nukleären Rezeptor- und inflammatorischen Signalprogrammen beeinflusst FXR die Physiologie von Hepatozyten und Enterozyten, die Barrierefunktion und die metabolische Anpassung. Eine Fehlregulation der NR1H4/FXR-Aktivität wurde mit cholestatischen und metabolischen Leberphänotypen in Verbindung gebracht und wird häufig im Kontext von Steatose, nichtalkoholischer Fettlebererkrankung und Störungen der Darm–Leber-Achse untersucht.

FXR/NR1H4 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente NR1H4-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

FXR/NR1H4 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der NR1H4-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen FXR/NR1H4-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen NR1H4-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.