FOXF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403521

Visão geral

FOXF1 (forkhead box F1) codifica um fator de transcrição da família forkhead que controla a identidade de células mesenquimais e a sinalização epitélio–mesênquima durante o desenvolvimento, com papéis de destaque na morfogênese do pulmão e da vasculatura pulmonar. O FOXF1 regula programas gênicos ligados à organização da matriz extracelular, à migração celular e à diferenciação de músculo liso/pericitos, integrando-se a vias de desenvolvimento como Hedgehog, WNT/β-catenina e sinalização por TGF-β. Alterações na dosagem de FOXF1 ou perturbações regulatórias têm sido associadas a anomalias congênitas pulmonares e vasculares e vêm sendo investigadas em contextos de remodelamento estromal aberrante e de interações entre tumor e microambiente. Como uma proteína nuclear que se liga ao DNA, o FOXF1 oferece um ponto de entrada viável para dissecar redes transcricionais que coordenam o padrão tecidual e a estabilidade vascular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FOXF1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FOXF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FOXF1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FOXF1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FOXF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FOXF1 para a investigação da sinalização de FOXF1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FOXF1 críticos para a função FOXF1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FOXF1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FOXF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FOXF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FOXF1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FOXF1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FOXF1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FOXF1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FOXF1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.