FOXC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420370

概要

Foxc2は、フォークヘッドボックス転写因子FOXC2をコードしており、マウスにおいて間葉系細胞のアイデンティティ、血管およびリンパ管の発生、ならびに脂肪組織のリモデリングを制御する遺伝子発現プログラムを統括するDNA結合性の調節因子です。FOXC2は核内で駆動される転写ネットワークの中で機能し、TGF-βやNotchなどの発生シグナル伝達経路と交差しながら、内皮分化、細胞外マトリックスの組織化、上皮—間葉転換（EMT）様の過程に影響を与えます。FOXC2活性の変化は、リンパ管新生の破綻、異常な血管パターニング、さらに代謝状態や間質状態のシフトと関連づけられており、これらは発生異常や腫瘍微小環境の生物学を扱うモデルで一般的に研究されています。こうした役割から、Foxc2は組織形態形成および細胞運命決定の転写制御を解明するための有用な結節点となります。

FOXC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるFoxc2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Foxc2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Foxc2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FOXC2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FOXC2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Foxc2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FOXC2の機能に不可欠なFoxc2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Foxc2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FOXC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびFOXC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Foxc2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FOXC2 HDRプラスミド（m）および FOXC2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFoxc2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFoxc2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。