FOP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407061

概要

FGFR1OPはFOP（fibroblast growth factor receptor 1 oncogene partner）をコードしており、FOPは中心体および微小管に関連するタンパク質で、中心体周囲物質（PCM）の組織化や、有糸分裂時の微小管アンカリングの維持に関与するとされています。中心体スキャフォールドや細胞骨格ネットワークとの相互作用を通じて、FOPは細胞周期の進行、紡錘体のダイナミクス、細胞内輸送などの過程に寄与します。FGFR1OPは、FGFR1を含む染色体再編成の文脈で研究されており、異常なシグナル伝達や造血細胞の挙動変化との関連が示唆されています。FOPの生物学に関連する中心体機能および微小管組織化の破綻は、がん研究や細胞分裂研究モデルで用いられるゲノム不安定性の表現型とも関連します。

FOP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFGFR1OP遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FGFR1OP内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FGFR1OPのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FOPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FOPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FGFR1OP欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FOPの機能に不可欠なFGFR1OPエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FGFR1OPゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FOP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFOP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FGFR1OP遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FOP HDRプラスミド（h）および FOP HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFGFR1OPホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFGFR1OP標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。