Plásmido Doble Nickase (h) Flt-1/VEGFR1: sc-400330-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Flt-1/VEGFR1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Flt-1/VEGFR1 (h) y el plásmido de doble nickasa Flt-1/VEGFR1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FLT1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Flt-1/VEGFR1 Anticuerpo (D-2): sc-271789
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Flt-1/VEGFR1 | sc-400330-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Flt-1/VEGFR1 | sc-400330-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FLT1 codifica Flt-1/VEGFR1, un receptor tirosina quinasa de alta afinidad para VEGF-A, VEGF-B y el factor de crecimiento placentario (PlGF), que modula la señalización endotelial y la homeostasis vascular. Tras la unión del ligando, VEGFR1 participa en la señalización de la vía de VEGF con efectos posteriores sobre las cascadas MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ y la familia SRC, dando forma a la migración, la supervivencia y la permeabilidad endoteliales. El empalme alternativo genera VEGFR1 soluble (sFlt-1), un receptor señuelo que secuestra ligandos de VEGF y ajusta el equilibrio angiogénico. La actividad desregulada de FLT1/VEGFR1 se ha implicado en la angiogénesis aberrante y la remodelación vascular observadas en la biología del cáncer, la enfermedad neovascular retiniana, las patologías relacionadas con la isquemia y los microambientes inflamatorios.
Flt-1/VEGFR1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FLT1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FLT1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FLT1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FLT1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.