Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FLJ23356 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406964
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FLJ23356 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FLJ23356, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FLJ23356 Anticorpo (S-23): sc-100433
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FLJ23356 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406964 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
POMK (quinase de O-manose proteica), também referido como FLJ23356, codifica uma quinase localizada no Golgi, necessária para a fosforilação de O-manose na α-distroglicana, uma etapa-chave na maturação de glicanos que sustenta a ligação à matriz extracelular. Essa atividade atua na rede de O-manosilação e de glicosilação relacionada às distroglicanopatias, intersetando-se com vias que regulam a organização da membrana basal, a adesão celular e a integridade dos tecidos muscular e cerebral. A disrupção da glicosilação dependente de POMK prejudica as interações de ligantes da α-distroglicana e perturba complexos de sinalização associados à membrana. Defeitos genéticos em POMK estão associados a distroglicanopatias e a fenótipos de distrofia muscular congênita, tornando-o um locus útil para modelar mecanismos de doença ligados à glicosilação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FLJ23356 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene POMK em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do POMK, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do POMK na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FLJ23356.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de POMK para a investigação da sinalização de FLJ23356, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) POMK críticos para a função FLJ23356
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos POMK para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FLJ23356 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FLJ23356 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus POMK. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FLJ23356 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FLJ23356 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia POMK para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo POMK definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.