Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Fibulin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401754
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Fibulin-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Fibulin-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Fibulin-1 Anticorpo (B-5): sc-25281
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Fibulin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401754 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FBLN1 codifica a fibulina-1, uma glicoproteína secretada da matriz extracelular (MEC) que se associa a membranas basais e a matrizes ricas em fibras elásticas, sustentando a arquitetura tecidual e a comunicação entre células e matriz. A fibulina-1 interage com múltiplos componentes da MEC para influenciar a adesão celular, a migração e a mecanotransdução, conectando a organização da matriz a programas de sinalização que regulam proliferação e diferenciação. Por meio dessas funções, FBLN1 contribui para a homeostase vascular e do tecido conjuntivo e é frequentemente investigado em contextos de remodelamento, como fibrose, alterações estromais associadas à inflamação e evolução do microambiente tumoral. Alterações na expressão ou na deposição de fibulina-1 foram relatadas em estudos cardiovasculares e relacionados ao câncer, motivando trabalhos mecanísticos sobre fenótipos dirigidos pela MEC e sinalização dependente da matriz.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Fibulin-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FBLN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FBLN1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FBLN1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Fibulin-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FBLN1 para a investigação da sinalização de Fibulin-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FBLN1 críticos para a função Fibulin-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FBLN1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Fibulin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Fibulin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FBLN1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Fibulin-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Fibulin-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FBLN1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FBLN1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.