Fibrinogen α CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400793

概要

FGAはフィブリノゲンα鎖をコードしており、肝臓由来の分泌性糖タンパク質です。α鎖はβ鎖およびγ鎖と会合して、フィブリンの可溶性前駆体であるフィブリノゲンを形成します。血管が損傷すると、トロンビンによるフィブリノゲンの切断を契機に、凝固カスケードの中で重合および架橋反応が開始され、血栓を安定化させるとともに、血小板の接着を支えます。フィブリン（およびフィブリノゲン）は、インテグリンなどの受容体との相互作用を介して細胞外マトリックスのリモデリングや炎症シグナル伝達にも関与し、止血と創傷修復を結び付けます。FGAの機能や発現の変化は、量的または質的なフィブリノゲン異常と関連し、血栓形成に影響して血栓傾向や出血傾向の表現型を修飾し得るため、凝固生物学および血管炎症の研究において重要です。

Fibrinogen α CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFGA遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FGA内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FGAのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Fibrinogen αタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Fibrinogen αシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FGA欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Fibrinogen αの機能に不可欠なFGAエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FGAゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Fibrinogen α CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFibrinogen α CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FGA遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Fibrinogen α HDRプラスミド（h）および Fibrinogen α HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFGAホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFGA標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。