FGF-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403127

概要

FGF8 は線維芽細胞増殖因子 8（fibroblast growth factor 8：FGF-8）をコードしており、分泌性のシグナル伝達リガンドとして FGFR ファミリー受容体に結合し、胚発生におけるパターニング、組織の形態形成、細胞運命の決定を制御します。FGF-8 は RAS–MAPK/ERK、PI3K–AKT、PLCγ などの代表的な RTK 経路を活性化し、状況依存的に増殖・移動・分化プログラムに影響を与えます。FGF8 の発現異常や FGFR 経路活性の破綻は、発生異常に加え、複数の腫瘍タイプにおけるがん化シグナルネットワークとも関連づけられており、増殖因子シグナルの変化によって系譜プログラムや微小環境との相互作用が再編成され得ます。研究分野では、FGF8 は発生生物学における役割、増殖因子依存的な転写プログラム、ならびに組織恒常性を制御する経路間クロストークの観点から広く解析されています。

FGF-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFGF8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FGF8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FGF8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FGF-8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FGF-8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FGF8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FGF-8の機能に不可欠なFGF8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FGF8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FGF-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFGF-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FGF8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FGF-8 HDRプラスミド（h）および FGF-8 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFGF8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFGF8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。