FGF-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405239

概要

FGF6は、分泌型シグナルリガンドである線維芽細胞増殖因子6（FGF-6）をコードしており、主としてFGFRに結合して下流のMAPK/ERK、PI3K/AKT、PLCγ経路を活性化します。FGF-6は細胞増殖・生存・分化の制御に関与し、特に骨格筋の発生、再生、ならびに組織リモデリングにおいて重要な役割を果たします。FGF6シグナルの変化は、増殖因子によって駆動される転写プログラムや細胞外マトリックス関連プロセスを乱し得るため、異常な増殖シグナルや系譜決定の研究において重要です。ヒト細胞系では、FGF-6は増殖因子間クロストークや、状況依存的なFGFR経路出力を解析するための扱いやすい標的となります。

FGF-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFGF6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FGF6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FGF6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FGF-6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FGF-6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FGF6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FGF-6の機能に不可欠なFGF6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FGF6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FGF-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFGF-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FGF6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FGF-6 HDRプラスミド（h）および FGF-6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFGF6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFGF6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。