FGF-17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405951

概要

FGF17は、線維芽細胞増殖因子17（FGF-17）をコードしており、主にFGFRファミリーの受容体型チロシンキナーゼを介してシグナルを伝達する、分泌性のヘパリン結合性リガンドです。FGF-17は細胞増殖、生存、系譜（運命）決定の調節に関与します。FGF-17の活性化により、RAS–MAPK/ERKやPI3K–AKTなどの典型的なRTKシグナル伝達カスケードが作動し、組織パターニングや、状況依存的な有糸分裂促進プログラムに影響を与えます。ヒト生物学において、FGF/FGFRシグナルの破綻は発生過程の変化やがん関連経路の活性化としばしば結び付けられており、FGF17は増殖因子駆動型シグナル伝達ダイナミクスを研究するうえで有用なノードとなります。FGF17を検討することは、パラクリン／オートクリンの細胞間コミュニケーション、細胞外マトリックスによって調節されるリガンドの利用可能性、ならびに疾患関連表現型を形成しうる経路間クロストークに関する機序研究を支えます。

FGF-17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFGF17遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FGF17内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FGF17のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FGF-17タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FGF-17シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FGF17欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FGF-17の機能に不可欠なFGF17エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FGF17ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FGF-17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFGF-17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FGF17遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FGF-17 HDRプラスミド（h）および FGF-17 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFGF17ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFGF17標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。