Plásmido Doble Nickase (h) FBXO34: sc-412420-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FBXO34 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FBXO34 (h) y el plásmido de doble nickasa FBXO34 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FBXO34. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FBXO34 | sc-412420-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FBXO34 | sc-412420-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FBXO34 codifica una proteína tipo F-box que se predice que actúa como componente de reconocimiento de sustratos de los complejos de ligasa E3 de ubiquitina SCF (SKP1–CUL1–F-box), acoplando dianas específicas a la ubiquitinación y a su degradación por el proteasoma. A través de esta función, FBXO34 puede influir en la proteostasis, la progresión del ciclo celular y la dinámica de señalización al regular la estabilidad de efectores de distintas vías. La alteración de la actividad del sistema ubiquitina–proteasoma se ha implicado ampliamente en la estabilidad genómica, las respuestas al estrés y fenotipos relevantes para el cáncer, lo que convierte a FBXO34 en un nodo útil para estudios mecanísticos sobre la degradación regulada de proteínas. Investigar FBXO34 contribuye al mapeo de vías de ubiquitinación dependientes de SCF y a la identificación de sustratos aguas abajo que conectan el recambio proteico con la homeostasis celular.
FBXO34 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FBXO34 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FBXO34. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FBXO34. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FBXO34 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.