Plásmido Doble Nickase (h) FBL16: sc-414575-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FBL16 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FBL16 (h) y el plásmido de doble nickasa FBL16 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FBXL16. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FBL16 | sc-414575-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FBL16 | sc-414575-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FBXL16 (FBL16) codifica una proteína con dominio F-box que se predice que actúa como componente de reconocimiento de sustratos de los complejos ligasa E3 de ubiquitina SCF (SKP1–CUL1–RBX1), influyendo así en la degradación proteasomal dependiente de ubiquitina de proteínas diana. A través de este papel, FBXL16 se vincula con la regulación de la homeostasis proteica y de las salidas de señalización celular que dependen de la degradación oportuna de los efectores de las vías. La modulación de la actividad de SCF/F-box puede afectar la progresión del ciclo celular, las respuestas al estrés y los programas transcripcionales al alterar la estabilidad de proteínas reguladoras. La desregulación de componentes de la vía ubiquitina–proteasoma, incluidos los adaptadores F-box, se asocia con frecuencia a estados de señalización alterados observados en el cáncer y en otros trastornos caracterizados por un desequilibrio de la proteostasis.
FBL16 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FBXL16 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FBXL16. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FBXL16. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FBXL16 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.