FAM83B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-415158

概要

FAM83B（family with sequence similarity 83 member B）は細胞質のシグナル伝達アダプターであり、受容体型チロシンキナーゼの出力増幅や下流のMAPK/ERK経路活性に関与し、上皮細胞における増殖・生存プログラムを支えます。EGFR/RASシグナルの動態調節やPI3K関連プロセスとのクロストークにも関連づけられており、転写応答や細胞周期進行に影響を及ぼします。FAM83Bの発現異常は複数の腫瘍コンテキストで報告されており、がん原性シグナルの堅牢性、治療耐性表現型、増殖因子依存性の変化に寄与する因子として研究されています。これらの特性から、FAM83Bは、がん生物学モデルにおける経路の配線、フィードバック制御、遺伝子型—表現型関係を解明するうえで有用な結節点となります。

FAM83B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFAM83B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FAM83B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FAM83Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FAM83Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FAM83Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FAM83B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FAM83Bの機能に不可欠なFAM83Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FAM83Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FAM83B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFAM83B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FAM83B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FAM83B HDRプラスミド（h）および FAM83B HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFAM83Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFAM83B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。