FAIM CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423872

概要

Faimは、Fasアポトーシス抑制分子（FAIM）をコードしており、デスレセプターによって誘導されるアポトーシスを弱め、Fas/TNFRファミリーからのシグナルに応答して細胞の生存シグナル伝達を調節する細胞保護因子です。マウス細胞では、FAIMはカスパーゼ活性化の制御、ストレス応答、ならびにNF-κBやPI3K/AKTといった生存経路の調節に関与することが示されており、免疫活性化や組織恒常性の維持における細胞運命を左右します。FAIM活性の変化は、リンパ球生存の破綻、神経変性に関連するストレス感受性、炎症性表現型などと関連づけられており、アポトーシス制御と細胞運命決定の研究において重要です。Faimの機能解析は、免疫学、神経生物学、ならびに外因性アポトーシス刺激への抵抗性を規定する経路の機序解明研究を後押しします。

FAIM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるFaim遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Faim内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Faimのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FAIMタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FAIMシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Faim欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FAIMの機能に不可欠なFaimエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Faimゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FAIM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびFAIM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Faim遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FAIM HDRプラスミド（m）および FAIM HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFaimホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFaim標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。