Plásmido Doble Nickase (h) Factor XIII B: sc-403574-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Factor XIII B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Factor XIII B (h) y el plásmido de doble nickasa Factor XIII B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a F13B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Factor XIII B Anticuerpo (GMA-033): sc-65957
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Factor XIII B | sc-403574-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Factor XIII B | sc-403574-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
F13B codifica la subunidad B del factor XIII de la coagulación, una proteína transportadora no catalítica que estabiliza la subunidad A (F13A1) en el plasma y regula su disponibilidad para la activación durante la fase terminal de la cascada de coagulación. Tras la activación del factor XIII dependiente de trombina y calcio, la transglutaminasa de la subunidad A entrecruza la fibrina y otras proteínas de la matriz extracelular, aumentando la resistencia tensil del coágulo y su resistencia a la fibrinólisis. A través de estos procesos, la subunidad B del factor XIII contribuye a la hemostasia y vincula la coagulación con las vías de reparación de heridas y remodelación de la matriz. Las alteraciones genéticas o funcionales en F13B se asocian con fenotipos de deficiencia de factor XIII y con una estabilidad del coágulo alterada, lo que lo hace relevante para estudios de trastornos hemorrágicos y de biología tromboinflamatoria.
Factor XIII B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus F13B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de F13B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de F13B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con F13B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.