Plásmido Doble Nickase (h) Factor VII: sc-402582-NIC

El gen humano **F7** codifica el **factor VII de la coagulación**, un cimógeno de **serina proteasa dependiente de vitamina K** producido principalmente por los hepatocitos y secretado al plasma. Tras una lesión vascular, el factor VII se une al **factor tisular (F3)** y se convierte en **factor VIIa**, formando el **complejo tenasa extrínseca** que inicia la cascada de coagulación mediante la activación del **factor X** y del **factor IX**, con generación posterior de trombina y formación de fibrina. Este eje **factor tisular–factor VIIa** también se cruza con la señalización celular a través de los **receptores activados por proteasas (PAR)**, conectando la proteólisis hemostática con vías de la biología inflamatoria y vascular. Las alteraciones en la expresión o la actividad de **F7** se asocian con diátesis hemorrágicas y también se estudian en el contexto del riesgo de trombosis y del diálogo entre coagulación e inflamación.

Factor VII El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus F7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de F7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de F7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con F7 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.