FAAP20 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410649

Descripción general

FAAP20 (proteína 20 asociada al complejo central de anemia de Fanconi) es un componente de la red de reparación del ADN de la anemia de Fanconi (FA) que favorece la estabilidad del genoma durante el estrés replicativo. Se asocia con el complejo central de FA y contribuye a la activación de la vía de FA necesaria para la reparación de los entrecruzamientos interhebra, coordinando el procesamiento de las lesiones con la protección de la horquilla de replicación. A través de estas funciones, FAAP20 influye en la sensibilidad celular al daño por agentes que inducen entrecruzamientos en el ADN y ayuda a mantener la integridad cromosómica. La desregulación de componentes de la vía de FA, incluido FAAP20, se asocia con una capacidad reducida de reparación del ADN y con la acumulación de mutaciones relevantes para la biología del cáncer y para síndromes hereditarios de inestabilidad cromosómica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FAAP20 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FAAP20 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FAAP20 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FAAP20 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FAAP20.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FAAP20 para la investigación de la señalización de FAAP20, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FAAP20 críticos para la función de FAAP20
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FAAP20 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FAAP20 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FAAP20 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FAAP20. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FAAP20 (h) y el plásmido HDR FAAP20 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FAAP20 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FAAP20 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.