Exportin 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404915

概要

XPO6はエクスポーチン6（Exportin 6）をコードしており、RanGTP依存性の核外輸送受容体として、プロフィリン–アクチン複合体を核から細胞質へ選択的に輸送します。核内アクチンの利用可能性を制御することで、エクスポーチン6はアクチン依存的なクロマチンリモデリング、転写制御、および細胞周期に連動した核構造に影響を与えます。この核‐細胞質間輸送経路は、遺伝子発現プログラムやストレス応答を協調させる、より広範なRan／インポーチン‐エクスポーチン輸送ネットワークとも連関しています。XPO6に関与するアクチンダイナミクスおよび核輸送制御の変化は、腫瘍細胞の挙動に関連する状況や、細胞骨格および転写の制御異常を特徴とするその他の疾患の文脈で研究されています。

Exportin 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるXPO6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、XPO6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、XPO6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Exportin 6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Exportin 6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、XPO6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Exportin 6の機能に不可欠なXPO6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、XPO6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Exportin 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびExportin 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、XPO6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Exportin 6 HDRプラスミド（h）および Exportin 6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはXPO6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のXPO6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。