Ets-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423871

概要

マウスEts2は、ETSファミリーに属する転写因子Ets-2をコードしており、DNAに結合して遺伝子発現プログラムを調節することで、増殖、分化、生存、ならびに細胞外マトリックスのリモデリングを制御します。Ets-2はMAPK/ERKや関連するキナーゼカスケードの下流シグナルを統合し、刺激依存的な転写応答を可能にすることで、免疫細胞の活性化、発生過程、組織恒常性の形成に関与します。ETS2活性の異常な制御は、炎症関連遺伝子の発現変化、間質細胞および上皮細胞の異常な挙動、さらに複数のモデル系における腫瘍性の転写ネットワークと関連づけられています。転写制御の結節点となる調節因子として、Ets-2はサイトカイン、マトリックスメタロプロテアーゼ、細胞周期関連遺伝子の転写制御における役割が一般に研究されています。

Ets-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるEts2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ets2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ets2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Ets-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Ets-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ets2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Ets-2の機能に不可欠なEts2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ets2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Ets-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびEts-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ets2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Ets-2 HDRプラスミド（m）および Ets-2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはEts2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のEts2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。