Plasmide Double Nickase (h) ERdj4: sc-410882-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ERdj4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ERdj4 Double Nickase (h) et le plasmide ERdj4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DNAJB9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ERdj4 | sc-410882-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ERdj4 | sc-410882-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’ADNJB9 humain code ERdj4, un co-chaperon Hsp40/DnaJ luminal du réticulum endoplasmique (RE) qui s’associe à BiP/HSPA5 pour favoriser le repliement des protéines et assurer le contrôle qualité du RE. ERdj4 participe à la réponse aux protéines mal repliées (UPR) et à la dégradation associée au RE (ERAD), en soutenant la protéostasie via la reconnaissance de protéines clientes mal conformées et la facilitation de leur prise en charge en situation de stress du RE. Par ces voies, DNAJB9 contribue à réguler la maturation des protéines sécrétées et l’adaptation cellulaire au stress protéotoxique, des processus impliqués dans des troubles caractérisés par une agrégation protéique aberrante et une signalisation UPR chronique. Une expression modifiée de DNAJB9/ERdj4 a été rapportée dans des contextes de stress cellulaire et a servi de marqueur moléculaire dans des études reliant la protéostasie du RE à des dysfonctionnements inflammatoires et métaboliques.
ERdj4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DNAJB9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DNAJB9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DNAJB9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DNAJB9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.