Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
ErbB4/HER4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420220
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ErbB4/HER4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ErbB4/HER4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ErbB4/HER4 Anticorpo (C-7): sc-8050
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ErbB4/HER4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420220 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Erbb4 codifica a tirosina-quinase receptora ErbB4/HER4, um membro da família EGFR/ErbB que se liga a neuregulinas e a outros ligantes do tipo EGF para regular a sinalização célula–célula. Após a dimerização induzida pelo ligante, o ErbB4 ativa cascatas a jusante, incluindo PI3K–AKT, RAS–RAF–MEK–ERK, JAK–STAT e PLCγ/PKC, moldando programas de proliferação, sobrevivência, diferenciação e migração. Em tecidos de camundongo, o ErbB4 é particularmente importante no neurodesenvolvimento e na sinalização sináptica, bem como na biologia epitelial e cardíaca, onde contribui para o padrão e a homeostase impulsionados por fatores de crescimento. A desregulação da sinalização de ErbB4 e alterações no crosstalk entre vias têm sido implicadas em redes de sinalização relacionadas ao câncer e em fenótipos neurológicos, sustentando seu uso como um nó mecanístico para estudos de vias e de relações genótipo–fenótipo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ErbB4/HER4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Erbb4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Erbb4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Erbb4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ErbB4/HER4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Erbb4 para a investigação da sinalização de ErbB4/HER4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Erbb4 críticos para a função ErbB4/HER4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Erbb4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ErbB4/HER4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ErbB4/HER4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Erbb4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ErbB4/HER4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ErbB4/HER4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Erbb4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Erbb4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.