ErbB4/HER4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400275

概要

ERBB4は、受容体型チロシンキナーゼであるErbB4/HER4をコードしており、ネオレグリンなどのリガンド下流のシグナル伝達を仲介するEGFR/ErbBファミリーの一員です。リガンドによって二量体化と自己リン酸化が誘導されると、ErbB4はMAPK/ERK、PI3K–AKT、JAK/STAT、PLCγ経路を活性化し、増殖、分化、遊走、生存などを含む細胞運命の決定を制御します。ERBB4の活性は受容体のエンドサイトーシスやプロテアーゼによる切断処理とも関連しており、特定の細胞状況において核内シグナルの出力を調節し得ます。ERBB4シグナルの破綻や発現量、あるいはアイソフォーム利用の変化は、上皮・神経・心臓の生物学における腫瘍性シグナルネットワークや疾患関連の表現型と関連づけられています。

ErbB4/HER4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるERBB4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ERBB4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ERBB4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ErbB4/HER4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ErbB4/HER4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ERBB4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ErbB4/HER4の機能に不可欠なERBB4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ERBB4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ErbB4/HER4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびErbB4/HER4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ERBB4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ErbB4/HER4 HDRプラスミド（h）および ErbB4/HER4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはERBB4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のERBB4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。