ErbB3/HER3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420219
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ErbB3/HER3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ErbB3/HER3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ErbB3/HER3 Anticorpo (G-4): sc-7390
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ErbB3/HER3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420219 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Erbb3 codifica a tirosina-quinase receptora ErbB3/HER3, um membro da família EGFR/ErbB que forma preferencialmente heterodímeros com ERBB2 para transmitir sinais de fatores de crescimento. Apesar da atividade quinase intrínseca limitada, o ErbB3 oferece múltiplos sítios de ancoragem para a PI3K e acopla fortemente a estimulação por ligante à sinalização PI3K–AKT, com crosstalk adicional para processos regulados por MAPK/ERK e mTOR. Em células de camundongo, o ErbB3 contribui para programas de desenvolvimento e homeostase tecidual, influenciando a diferenciação epitelial, a sobrevivência e a migração por meio do tráfego de receptores e da regulação por feedback. A sinalização desregulada de ERBB envolvendo HER3 é frequentemente estudada em contextos de remodelamento oncogênico de redes de receptores e de adaptações de sinalização associadas à resistência, tornando o Erbb3 um nó comum para a investigação de vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ErbB3/HER3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Erbb3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Erbb3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Erbb3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ErbB3/HER3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Erbb3 para a investigação da sinalização de ErbB3/HER3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Erbb3 críticos para a função ErbB3/HER3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Erbb3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ErbB3/HER3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ErbB3/HER3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Erbb3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ErbB3/HER3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ErbB3/HER3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Erbb3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Erbb3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.