Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) ERAP1: sc-403804-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ERAP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ERAP1 (h) y el plásmido de doble nickasa ERAP1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ERAP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ERAP1 Anticuerpo (B-10): sc-271823
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ERAP1 | sc-403804-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ERAP1 | sc-403804-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La aminopeptidasa 1 del retículo endoplásmico (ERAP1) es una aminopeptidasa M1 dependiente de zinc que recorta precursores de péptidos antigénicos hasta longitudes óptimas para su carga en moléculas del MHC de clase I, moldeando el inmunopeptidoma celular e influyendo en el reconocimiento por células T CD8+. Funciona en la interfaz entre el procesamiento de proteínas en el RE y la presentación de antígenos, actuando aguas abajo de la degradación proteasomal y del transporte de péptidos mediado por TAP como parte de la vía del MHC I. Las variaciones en la actividad de ERAP1 pueden alterar la selección del repertorio peptídico y los umbrales de señalización inmunitaria, lo que la vincula con la susceptibilidad inmunogenética en varios contextos inflamatorios y autoinmunes, especialmente en combinación con alelos específicos de HLA de clase I. ERAP1 también se estudia por su papel en procesos adyacentes al estrés del RE y en la modulación de la inmunidad innata, donde el recorte de péptidos afecta a la vigilancia inmunitaria.
ERAP1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ERAP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ERAP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ERAP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ERAP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.