Plasmide Double Nickase (h) Eps8L1: sc-406032-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Eps8L1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Eps8L1 Double Nickase (h) et le plasmide Eps8L1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EPS8L1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Eps8L1 | sc-406032-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Eps8L1 | sc-406032-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPS8L1 code pour Eps8L1, un membre de la famille EPS8 de protéines régulatrices de l’actine qui relient la signalisation médiée par les récepteurs au remodelage du cytosquelette. Eps8L1 est impliquée dans des voies qui gouvernent la dynamique des filaments d’actine, la formation de protrusions membranaires et les changements de forme cellulaire favorisant l’adhésion et la motilité. Par ses interactions avec des partenaires de signalisation et du cytosquelette, EPS8L1 peut influencer des processus tels que l’endocytose et le remodelage du réseau d’actine cortical associé à la migration. Une régulation anormale de l’actine et des programmes de motilité est fréquemment associée à des phénotypes invasifs et à une organisation tissulaire aberrante, faisant d’EPS8L1 une cible pertinente pour des études mécanistiques du mouvement cellulaire et de la signalisation du cytosquelette.
Eps8L1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EPS8L1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EPS8L1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EPS8L1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EPS8L1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.