Epiregulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420224

概要

マウスEregはエピレグリンをコードしており、エピレグリンは分泌型のEGFファミリー分子としてEGFR/ERBB受容体に結合し、傍分泌および自己分泌シグナル伝達を調節します。エピレグリンは上皮細胞および間質細胞の増殖・生存・遊走を制御し、MAPK/ERK経路やPI3K/AKT経路の活性と連動しながら、創傷治癒や組織リモデリングのプログラム形成に関与します。Eregの発現は炎症や損傷のシグナルに応答して変動し、EGFRネットワークのシグナル伝達がサイトカイン駆動性の微小環境と交差する状況でしばしば研究対象となります。エピレグリンシグナルの破綻は、バリア機能の変化、線維化を伴うリモデリング、腫瘍性シグナル回路の形成と関連づけられており、腫瘍—間質相互作用や炎症関連の増殖因子シグナルを研究するうえでの機序的ハブとして位置づけられています。

Epiregulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるEreg遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ereg内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Eregのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Epiregulinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Epiregulinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ereg欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Epiregulinの機能に不可欠なEregエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Eregゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Epiregulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびEpiregulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ereg遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Epiregulin HDRプラスミド（m）および Epiregulin HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはEregホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のEreg標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。