Plasmide Double Nickase (h) EphB6: sc-403979-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) EphB6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide EphB6 Double Nickase (h) et le plasmide EphB6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EPHB6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: EphB6 Antibody (D-7): sc-398795
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) EphB6 | sc-403979-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) EphB6 | sc-403979-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPHB6 code pour EphB6, un membre à activité kinase altérée de la famille des récepteurs tyrosine kinases Eph, qui régule la communication cellule–cellule via des interactions avec les ligands éphrine-B. EphB6 participe à une signalisation dépendante du contact qui module le remodelage du cytosquelette, l’adhérence et la migration directionnelle, influençant des processus tels que l’organisation épithéliale et le comportement des cellules immunitaires. Grâce à des interactions fonctionnelles avec des voies incluant la signalisation des GTPases Rho ainsi que les réseaux MAPK/ERK et PI3K/AKT, EphB6 peut façonner des programmes transcriptionnels en aval et des décisions de destin cellulaire. Une expression altérée d’EPHB6 a été associée à la progression tumorale et à des phénotypes métastatiques dans plusieurs contextes de cancer, ce qui étaye son utilisation comme cible pour des études mécanistiques de l’invasion et de la signalisation du microenvironnement.
EphB6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EPHB6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EPHB6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EPHB6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EPHB6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.