Plasmide Double Nickase (h) EphA10: sc-407999-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) EphA10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide EphA10 Double Nickase (h) et le plasmide EphA10 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EPHA10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) EphA10 | sc-407999-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) EphA10 | sc-407999-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPHA10 code EphA10, un membre de la famille des récepteurs tyrosine kinases Eph, qui participe à la communication cellule–cellule via une signalisation dépendante des éphrines. Les voies associées à EphA10 régulent des signaux de guidage dépendants du contact, le remodelage du cytosquelette et la dynamique d’adhérence qui façonnent la migration cellulaire et l’organisation tissulaire au cours du développement et dans les épithéliums adultes. Comme pour les autres récepteurs Eph, une expression altérée ou un déséquilibre de la signalisation peut perturber la formation des frontières et les programmes de motilité liés à la progression oncogénique et au comportement métastatique. EPHA10 est donc étudié dans le contexte des réseaux de récepteurs tyrosine kinases, de la plasticité épithéliale et du remodelage des voies de signalisation associées au cancer.
EphA10 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EPHA10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EPHA10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EPHA10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EPHA10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.