eotaxin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405762

概要

CCL26はエオタキシン-3をコードしており、CCR3に結合するCCケモカインとして、好酸球・好塩基球・Th2極性化免疫細胞の走化性誘導および活性化を担います。CCL26の発現は、IL-4/IL-13シグナルがJAK–STAT6経路を介して上皮系および間質系の区画で誘導されることが多く、2型炎症プログラムや白血球トラフィッキングとの関連が示されています。エオタキシン-3は、組織炎症の制御、バリア関連免疫応答、ならびにサイトカイン–ケモカインネットワークの増幅に寄与します。CCL26の制御異常やエオタキシン-3の上昇は、アレルギー性疾患や好酸球関連炎症病態で報告されており、炎症研究における機序解明の要となる分子として有用性が支持されています。

eotaxin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCCL26遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CCL26内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CCL26のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、eotaxin-3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、eotaxin-3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CCL26欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• eotaxin-3の機能に不可欠なCCL26エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CCL26ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• eotaxin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびeotaxin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CCL26遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  eotaxin-3 HDRプラスミド（h）および eotaxin-3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCCL26ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCCL26標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。