ENC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406167

概要

ENC1（ectodermal-neural cortex 1）は、ケルチリピートファミリーに属するアクチン結合タンパク質をコードしており、細胞骨格の再構築と細胞分化プログラムを結び付ける役割を担います。ヒト細胞では、ENC1はアクチン動態の制御、酸化ストレス応答、そして状況依存的な増殖制御や神経系譜の特徴の制御に関与するとされ、発生や細胞状態の維持における役割が支持されています。ENC1の発現変化は複数の腫瘍タイプや神経生物学のモデルで報告されており、レドックスシグナル、細胞骨格の組織化、転写出力を結び付ける経路を研究する上で有用な結節点となります。これらの特性により、ENC1は分化、ストレス適応、がん関連表現型の機構研究における研究標的として位置付けられます。

ENC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるENC1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ENC1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ENC1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ENC1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ENC1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ENC1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ENC1の機能に不可欠なENC1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ENC1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ENC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびENC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ENC1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ENC1 HDRプラスミド（h）および ENC1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはENC1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のENC1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。