Emx1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420169

概要

EMX1（empty spiracles homeobox 1）は、マウス胚発生において終脳の初期パターニングおよび新皮質の領域化に機能する、paired-like型のホメオボックス転写因子である。神経前駆細胞の増殖、神経細胞への分化、皮質の層形成を制御する遺伝子発現プログラムを調節し、前脳の領域アイデンティティを形作るWNT/β-カテニンやSHHなどの発生シグナルネットワークと統合的に作用する。Emx1の発現は背側終脳系譜のマーカーとして広く用いられており、皮質形成や回路構築の機構的研究を可能にする。EMX1に関連する転写ネットワークの制御異常は、脳構造や興奮性ニューロン系譜の規定に影響する神経発達表現型と関連する。

Emx1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるEmx1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Emx1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Emx1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Emx1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Emx1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Emx1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Emx1の機能に不可欠なEmx1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Emx1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Emx1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびEmx1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Emx1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Emx1 HDRプラスミド（m）および Emx1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはEmx1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のEmx1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。