Emx1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420169

Visão geral

EMX1 (empty spiracles homeobox 1) é um fator de transcrição do tipo homeobox, semelhante aos “paired-like”, que atua no padrão inicial do telencéfalo e na arealização do neocórtex durante o desenvolvimento embrionário do camundongo. Ele regula programas de expressão gênica que controlam a proliferação de progenitores neurais, a diferenciação neuronal e a laminação cortical, integrando-se a redes de sinalização do desenvolvimento, como WNT/β-catenina e SHH, que determinam a identidade regional do prosencéfalo. A expressão de Emx1 é amplamente utilizada como marcador de linhagens do telencéfalo dorsal, possibilitando estudos mecanísticos da corticogênese e da montagem de circuitos. Redes transcricionais associadas ao EMX1, quando desreguladas, são relevantes para fenótipos do neurodesenvolvimento que afetam a estrutura cerebral e a especificação de linhagens de neurônios excitatórios.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Emx1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Emx1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Emx1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Emx1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Emx1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Emx1 para a investigação da sinalização de Emx1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Emx1 críticos para a função Emx1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Emx1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Emx1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Emx1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Emx1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Emx1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Emx1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Emx1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Emx1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.