Embigin Double Nickaseプラスミド (h): sc-408321-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Embigin Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Embiginダブルニカースプラスミド（h）およびEmbiginダブルニカースプラスミド（h2）は、EMBを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Embigin Double Nickaseプラスミド (h) | sc-408321-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Embigin Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-408321-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ヒトEMBは、モノカルボン酸トランスポーターの補助分子として機能し、細胞間および細胞–細胞外マトリックス間相互作用に寄与する、I型膜貫通型の免疫グロブリンスーパーファミリー糖タンパク質であるエンビジン（embigin）をコードする。乳酸などのモノカルボン酸のフラックスを調節し、接着に連動したシグナル伝達にも関与することで、エンビジンは代謝恒常性、膜輸送、ならびに細胞移動プログラムに影響を及ぼし得る。EMBの発現は組織リモデリングや代謝異常の文脈で検討されており、腫瘍に関連した代謝適応や微小環境との相互作用を研究する上で重要である。細胞表面局在とパートナー分子との相互作用特性は、トランスポーター制御機構および接着依存的経路のメカニズム解析を後押しする。
Embigin ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における EMB 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、EMB内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、EMBの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、EMBが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。