Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO EMAP II (m): sc-420161
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- EMAP II Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique EMAP II, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: EMAP II Antibody (A-4): sc-393228
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO EMAP II (m) | sc-420161 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Aimp1 code pour l’EMAP II (endothelial monocyte-activating polypeptide II), une protéine multifonctionnelle surtout connue comme facteur de type cytokine dérivé du composant AIMP1 du complexe multisynthétase des ARNt. L’EMAP II participe aux voies de signalisation du stress et de l’inflammation, en modulant la chimiotaxie des leucocytes, les réponses endothéliales et, plus largement, la régulation des processus de l’immunité innée. Dans des modèles murins, des modifications de l’activité d’Aimp1/EMAP II ont été associées à des voies contrôlant l’apoptose, la signalisation liée à l’angiogenèse et le remodelage tissulaire. La dérégulation de ces processus est pertinente pour l’étude de l’inflammation chronique, de la biologie du microenvironnement tumoral–immunitaire et des mécanismes de dysfonction vasculaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO EMAP II (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Aimp1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Aimp1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Aimp1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine EMAP II.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Aimp1 pour l'étude de la signalisation de EMAP II, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Aimp1 essentiels à la fonction de EMAP II
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Aimp1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le EMAP II plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le EMAP II plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Aimp1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le EMAP II plasmide HDR (m) et le EMAP II (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Aimp1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Aimp1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.