eIF4AII CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402758

概要

EIF4A2は、ヒトのATP依存性RNAヘリカーゼeIF4AIIをコードしている。eIF4AIIは翻訳開始複合体eIF4Fの中核構成要素であり、5′UTRの二次構造を再編成してキャップ依存的なリボソームのスキャニングを促進する。mRNAのリクルートや開始コドン認識を制御することで、eIF4AIIは細胞増殖、ストレス適応、分化に結び付いた全体的および転写産物選択的なタンパク質合成プログラムに影響を及ぼす。その活性はRNA代謝経路や翻訳制御の要所とも交差し、増殖や生存に影響する上流シグナル入力を統合する。eIF4Aファミリーの機能変化を含む翻訳開始の破綻は、がん性のプロテオーム再編成や、異常なmRNA制御に関連する他の疾患にしばしば関与するとされる。

eIF4AII CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるEIF4A2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、EIF4A2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、EIF4A2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、eIF4AIIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、eIF4AIIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、EIF4A2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• eIF4AIIの機能に不可欠なEIF4A2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、EIF4A2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• eIF4AII CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびeIF4AII CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、EIF4A2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  eIF4AII HDRプラスミド（h）および eIF4AII HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはEIF4A2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のEIF4A2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。