Plasmide Double Nickase (h) Egr-4: sc-403343-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Egr-4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Egr-4 Double Nickase (h) et le plasmide Egr-4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EGR4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Egr-4 | sc-403343-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Egr-4 | sc-403343-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EGR4 code pour Egr-4, un facteur de transcription à doigts de zinc de réponse immédiate, induit par des stimuli extracellulaires tels que les facteurs de croissance et l’activité neuronale. Egr-4 régule des programmes d’expression génique impliqués dans la différenciation cellulaire, la plasticité synaptique et le fonctionnement de l’axe reproducteur, en intégrant des signaux en amont provenant de MAPK/ERK et d’autres voies dépendantes de l’activité. En biologie humaine, EGR4 a été associé au développement neural et à la fonction gonadique, et les altérations des réponses transcriptionnelles de la famille EGR sont étudiées dans des contextes de phénotypes neuropsychiatriques et de reprogrammation transcriptionnelle associée aux tumeurs. En tant que régulateur sensible aux stimuli, Egr-4 est fréquemment utilisé comme marqueur de lecture et comme nœud pour disséquer les réseaux transcriptionnels qui gouvernent les transitions d’état cellulaire.
Egr-4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EGR4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EGR4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EGR4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EGR4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.